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                細胞培養中組織培養的汙染是如何消除的?
                文章來源:江蘇大发快三app下载有限公司   添加時間:2020/10/27 10:01:57 點擊率:173

                細胞培養技術也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對於整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來←說,細胞培養都是一個必不可少的過程。

                當細胞培養中組織培養被汙染的№時候,研究者會試圖消除或控制汙▲染。首先,確定汙染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把汙染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗黴菌素可能對一些細胞⊙系有毒性,因而,做劑量反應實驗確╱定抗生素和抗黴菌素〒產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性黴素B和抗黴菌素如泰樂菌素時◆尤其重要。下面是為您推薦確定毒性水平和消除培養汙染的實驗步驟:

                1. 在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞々,稀釋到常規細胞傳代的濃度。

                2. 分散細胞懸液到多孔培養板中,或幾個︼小培養瓶中。在一個濃度梯度範圍內,把選擇抗∩生素加入到每一個孔中。例如,兩性黴素B推薦下列濃◢度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

                3. 每天觀測細胞毒性ζ指標,如脫落,出現空泡,匯合度下→降和變圓。  

                4. 確定抗Ψ生素毒性水平後,使用低於毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養液∑培養細胞2~3代。

                5. 在無抗生素的培養基中培◣養細胞一代。

                6. 重復步驟4。

                7. 在無抗生素↓的培養基中培養4~6代,確∞定汙染是否以已被消除。


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