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                細胞培養中組織培養的汙染是如何消除的?
                文章來源:江蘇大发快三app下载有限公司   添加時間:2020/10/27 10:01:57 點擊率:114

                細▲胞培養技術也叫細胞克隆技術,在↑生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對於整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說∞,細胞培養都是一個必不可少的過程。

                當細胞培養中組織培養被汙染的時候,研究者會試圖消除或控制汙染。首先,確定汙染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把汙染細胞與其∞它細胞系隔離開,用實驗室☉消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗黴菌素可能對一些細胞系有毒▓性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗黴菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性黴素B和抗黴菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面ω 是為您推薦確定毒性水平和消除培養汙染的實驗步驟:

                1. 在無抗生素的培養基中消化、計數和」稀釋細胞,稀釋到常▆規細胞傳代的濃度。

                2. 分散細胞懸液到多孔培養板中,或幾個小培養瓶№中。在一個濃度梯◆度範圍內,把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性黴素B推薦¤下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

                3. 每天觀測細胞毒性※指標,如脫落,出現空泡,匯合度下降和變圓。  

                4. 確定抗生素毒性水▼平後,使用低於〖毒性濃度2~3倍濃度】的抗生素的培養液培養細胞2~3代。

                5. 在無⊙抗生素的培養基中培養細胞一代。

                6. 重復步驟4。

                7. 在無抗生素的培養基中培養4~6代,確定汙染是否以已〗被消除。


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